Orçamento
Reinforced clostridial meio base frasco 500g
Meio de cultura liofilizado. Indicado para o crescimento de clostrídios e anaeróbios exigentes, permitindo isolamento, enumeração e testes de esporos de bactérias importantes em segurança alimentar e saúde.
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Informações técnicas do produto
Reinforced clostridial meio base frasco 500g
Composição
Ingredientes Gms/Litro
Triptona - 10.000
Extrato de levedura - 3.000
Peptona HM B # - 10.000
Acetato de sódio - 5.000
Cloridrato de cisteína - 0,500
Amido solúvel - 1.000
Ágar - 1.000
pH final (a 25 °C) 5,6±0,1
Fórmula ajustada e padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho
# - Equivalente ao extrato de carne bovina
Instruções: Suspenda 30,50 gramas em 1000 ml de água purificada/destilada. Ajuste o pH para 5,5-5,7 com solução aquosa de ácido láctico a 20%. Aqueça, se necessário, para dissolver completamente o meio. Adicione 28 ml de lactato de sódio a 72%. Misture bem e distribua em tubos. Esterilize em autoclave a uma pressão de 15 libras (121 °C) por 15 minutos.
Princípio e interpretação: A base de meio reforçado para clostrídios foi formulada por Wehr & Frank (7). Os anaeróbios mesófilos formadores de esporos pertencentes ao gênero Clostridia, relevantes para os alimentos, são Gram-positivos, catalase-negativos, com bastonetes de tamanhos variados. O meio pode ser usado para iniciar o crescimento a partir de pequenas inoculações e para obter a maior contagem viável de Clostridia. Barnes e Ingram usaram o meio de caldo para diluir uma inoculação de células vegetativas de Clostridium perfringens (2). Ele pode ser usado em estudos de anaeróbios formadores de esporos, especialmente Clostridium butyricum em queijo, para enumeração de Clostridia em contagens de diluição em tubo ou para preparação de placas para isolamento (5). Outros anaeróbios formadores de esporos, Streptococci e Lactobacilli também crescem neste meio. Este é um meio de enriquecimento não seletivo. Triptona, extrato de levedura, peptona HM B, amido, L-cisteína e acetato de sódio fornecem carbono, nitrogênio, aminoácidos de cadeia longa, vitaminas e outros nutrientes necessários para o crescimento de Clostridia. A pequena quantidade de ágar ajuda a manter baixo o potencial redox para estabilizar o meio.
Tipo de amostra: Amostras de alimentos e laticínios.
Coleta e manuseio de amostras: Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (1,6,8). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados.
Advertências e precauções: Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/vestuário de proteção/proteção ocular/proteção facial. Siga as boas práticas microbiológicas de laboratório ao manusear amostras e culturas. As precauções padrão, de acordo com as diretrizes estabelecidas, devem ser seguidas ao manusear amostras. As diretrizes de segurança podem ser consultadas nas fichas de dados de segurança individuais.
Limitações: É necessária uma subcultura adicional para testes confirmatórios.
Desempenho e avaliação: O desempenho do meio é esperado quando utilizado de acordo com as instruções do rótulo, dentro do prazo de validade e quando armazenado à temperatura recomendada.
Controle de qualidade
Aparência: Pó homogêneo de cor creme a amarela, de fluxo livre.
Cor e clareza do meio preparado: Gel de cor amarela clara a ligeiramente opalescente forma-se em placas de Petri.
Reação: Reação de solução aquosa a 3,05% p/v a 25 °C. pH: 5,6 ± 0,1.
pH 5,50-5,70
Resposta cultural: Características culturais observadas em atmosfera anaeróbica após incubação a 35-37 °C durante 40-48 horas.
Organismo: Clostridium perfringens ATCC 13124 (00007*)
Crescimento: Bom – exuberante
Inóculo (CFU): 50 – 100
Organismo: Clostridium tyrobutyricum ATCC 25755
Crescimento: Bom – exuberante
Inóculo (CFU): 50 – 100
Organismo: Clostridium butyricum ATCC 13732
Crescimento: Bom – exuberante
Inóculo (CFU): 50 – 100
Legenda: (*) Números WDCM correspondentes
Armazenamento e prazo de validade: Armazenar entre 10 e 30 °C em um recipiente bem fechado e o meio preparado entre 20 e 30 °C. Utilizar antes da data de validade indicada no rótulo. Após a abertura, o produto deve ser armazenado adequadamente em local seco, após fechar bem o frasco, a fim de evitar a formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de grumos. Armazenar em local seco e ventilado, protegido de temperaturas extremas e fontes de ignição. Fechar bem o recipiente após o uso. O desempenho do produto é melhor se utilizado dentro do prazo de validade indicado.
Descarte: O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração das preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Siga os procedimentos laboratoriais estabelecidos para o descarte de materiais infecciosos, e os materiais que entrarem em contato com a amostra devem ser descontaminados e descartados de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (3,4).
Referências
1. American Public Health Association, Standard Methods for the Examination of Dairy Products, 1978, 14th Ed., Washington D.C.
2. Barnes and Ingram, 1956, J. Appl. Bact., 19:117.
3. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook 2nd Edition.
4. Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.
5. Lewis and Angelotti (Eds.), 1964, Examination of Foods for Enteropathogenic and Indicator Bacteria, Dept. of HEW, PHS Publication, 1142, Washington.
6. Salfinger Y., and Tortorello M.L. Fifth (Ed.), 2015, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 5th Ed., American Public Health Association, Washington, D.C.
7. Standard Methods for the Examination of Dairy products,Wehr & Frank, 2004, (item 8.100).
8. Wehr H. M. and Frank J. H., 2004, Standard Methods for the Microbiological Examination of Dairy Products, 17th Ed., APHA Inc., Washington, D.C.
