Meio tioglicolato alternativo frasco 500g

MEIO TIOGLICOLATO ALTERNATIVO - (M010) (Caldo Tioglicolato NIH)(Caldo Tioglicolato Alternativo) USO PRETENDIDO Recomendado para testes de esterilidade de produtos biológicos turvos ou viscosos. COMPOSIÇÃO** Ingredientes (g/L) Triptona: 15.000 Extrato de levedura: 5.000 Dextrose (Glicose): 5.500 Cloreto de sodio: 2.500 L-cistina: 0.500 Tioglicolato de sodio: 0.500 pH final (a 25°C): 7.1 ± 0.2 ** Fórmula ajustada, padronizada para atender os parâmentros de desmpenho INSTRUÇÕES Suspender 29,0g em 1000mL de água purificada/destilada. Aqueça, se necessário, para dissolver o meio completamente. Misture bem e distribua em tubos ou frascos estéreis conforme desejado. Esterilize em autoclave a 15 lbs de pressão (121°C) por 15 minutos. Nota: É preferível usar meio preparado na hora, alternativamente deve ser fervido e resfriado apenas uma vez antes de usar, pois no reaquecimento, formamse radicais tóxicos de oxigênio. PRINCÍPIOS E INTERPRETAÇÃO O meio tioglicolato alternativo é formulado conforme descrito no memorando do NIH (National Institutes Of Health) (1). É usado para o teste de esterilidade de certos produtos biológicos que são turvos ou viscosos e não podem ser testados usando Meio Fluido Tioglicolato (M009)(2). Ambos os meios possuem composição semelhante, exceto ágar e resazurina que não fazem parte do Meio Tioglicolato Alternativo. Essa exclusão o torna adequado para testes de esterilidade de produtos viscosos. A triptona serve como fonte de nitrogênio e compostos de carbono, aminoácidos de cadeia longa e outros nutrientes essenciais. O extrato de levedura serve como fonte de nutrientes essenciais aos contaminantes, se presentes. A dextrose serve como fonte de energia. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico do meio, enquanto a L-cistina, um aminoácido, também serve como fonte de fatores de crescimento essenciais. O tioglicolato de sódio e a L-cistina diminuem o potencial de oxirredução do meio removendo o oxigênio para manter um pH baixo. O tioglicolato de sódio também ajuda a neutralizar os efeitos tóxicos dos conservantes mercuriais (3,4). TIPO DE AMOSTRAS Clínicas: swabs de feridas, swabs ou raspagem de pele, tártaro dentário, etc. Farmacêuticas: teste de esterilidade de produtos viscosos COLETA E MANUSEIO DE AMOSTRAS Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para manusear amostras de acordo com as diretrizes estabelecidas (5,6). Para produtos farmacêuticos, siga as técnicas apropriadas para processamento de amostras no caso de materiais viscosos conforme mencionado em esterilidade (7). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. ADVERTÊNCIAS E PRECAUÇÕES Uso para diagnóstico in vitro. Apenas para uso profissional. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/ vestuário de proteção/ proteção ocular/ proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As orientações de segurança podem ser referidas em fichas de dados de segurança individuais. LIMITAÇÕES 1. Antes de usar, o meio deve ser fervido uma vez para remover o oxigênio absorvido e não deve ser reaquecido, pois a ebulição frequente leva ao desenvolvimento de produtos tóxicos. 2. O meio não deve ser usado no processo de fermentação, pois o meio contém extrato de levedura com alto teor de carboidratos. 3. Testes bioquímicos e procedimentos sorológicos são necessários para confirmar os achados. DESEMPENHO E AVALIAÇÃO O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções no rótulo dentro do período de validade quando armazenado na temperatura recomendada. CONTROLE DE QUALIDADE Apariência: Pó homogêneo de fluxo livre de creme a amarelo Cor e clareza do meio preparado: Solução límpida de cor amarela sem qualquer precipitado. Reação Reação de 2,9% p/v em solução aquosaa a 25°C. pH: 7,1±0,2 pH 6,90-7,30 Resposta Cultural Organismo: *Clostridium sporogenes ATCC 19404 (00008*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: *Clostridium sporogenes ATCC 11437 Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: *Clostridium sporogenes NBRC 14293 Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: *Clostridium perfringens ATCC 13124 (00007*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923(00034*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 6538 (00032*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 (00026*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: Escherichia coli ATCC 8739 (00012*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: Escherichia coli NCTC 9002 Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: Salmonella Abony NCTC 6017 (00029*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: *Bacteroides fragilis ATCC 23745 Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Organismo: *Bacteroides vulgatus ATCC 8482 Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Chave: (*) Números WDCM correspondentes. ARMAZENAMENTO E PRAZO DE VALIDADE Armazenar entre 10°C - 30°C em recipiente bem fechado e o meio preparado entre 15°C - 25°C. Use antes da data de validade no rótulo. Ao abrir, o produto deve ser armazenado adequadamente seco, após tampar bem o frasco para evitar a formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de grumos. Armazene em área seca e ventilada, protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche bem o recipiente após o uso. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade. DESCARTE O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Siga os procedimentos laboratoriais estabelecidos no descarte de materiais infecciosos e materiais que entrem em contato com amostras clínicas devem ser descontaminados e descartados de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (6,7). REFERÊNCIAS 1. N.I.H. Memorandum, 1955: Culture Media for Sterility Tests, 4th Revision. 2. Lapage S., Shelton J. and Mitchell T., 1970, Methods in Microbiology', Norris J. and Ribbons D., (Eds.), Vol. 3A, Academic Press, London. 3. Nungester, Hood and Warren, 1943, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., 52: 287 4. Portwood, 1944, J. Bacteriol., 48: 255 5. The United States Pharmacopoeia, 2020. The United States Pharmacopoeial Convention.Rockville, MD. 6. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook 2nd Edition. 7. Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.