Agar cromogênico tbx frasco 500g

Uso pretendido: Recomendado para a detecção e contagem de Escherichia coli em alimentos sem confirmação adicional no filtro de membrana ou pelo reagente indol. A composição e o desempenho desta mídia estão de acordo com as especificações estabelecidas na ISO 16649-2: 1999. Também pode ser usado para isolar Escherichia coli de amostras clínicas. Composição** Ingredientes Gms / Litro TriptonA 20.000 Mistura de sais biliares 1.500 X-glucuronida 0,075 Agar 15.000 PH final (a 25 ° C) 7,2 ± 0,2 ** Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho. Instruções Suspenda 36,57 gramas em 1000 ml de água purificada / destilada. Aqueça até a fervura para dissolver o meio completamente. Esterilize em autoclave a 15 lbs de pressão (121 ° C) por 15 minutos. Arrefecer a 45-50 ° C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis. Princípio e interpretação Agar cromogênio ™ E.coli é baseado em Tryptone Bile Agar para detectar Escherichia coli em alimentos (1), onde a recuperação de E.coli é mais rápida, confiável e precisa. A maioria das cepas de E. coli pode ser diferenciada de outros coliformes pela presença da enzima glucuronidase, que é altamente específica para E. coli (2). O agente cromogênico X-glucuronídeo usado neste meio ajuda a detectar a atividade da glucuronidase de E. coli. As células de E. coli absorvem o glicuronídeo X e a enzima glicuronidase intracelular divide a ligação entre o cromóforo e o glicuronídeo. O cromóforo liberado dá coloração verde azulada às colônias de E. coli. A formulação está de acordo com ISO 16649-2 (3). Também pode ser usado para isolar E. coli de amostras clínicas. Triptona fornece carbono, compostos de nitrogênio, aminoácidos de cadeia longa, vitaminas e outros nutrientes essenciais de crescimento para os organismos. A mistura de sais biliares inibe organismos Gram-positivos. A superfície do meio em placa é seca antes do uso. Diluir as amostras de alimentos 1: 5 ou 1:10 com água peptonada estéril 0,1% (p / v) (M028) e homogeneizar em um liquidificador ou um homogeneizador stomacher. Pipete 0,5 ml ou 1,0 ml da amostra de alimento homogeneizada para a placa e espalhe com espalhador de vidro estéril. Incubar as placas a 30 ° C por 4 horas e, em seguida, a 44 ° C por 18 horas. Tipo de espécime Amostras clínicas - fezes, urina, amostras de alimentos Coleta e manuseio de amostras Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio de amostras de acordo com as diretrizes estabelecidas (4,5). Para amostras de alimentos, siga as técnicas apropriadas de coleta e processamento de amostras de acordo com as diretrizes (6). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. Aviso e precauções Apenas para uso diagnóstico in vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / roupas de proteção / proteção ocular / proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrões de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser consultadas em fichas de dados de segurança individuais. Limitações 1. A ß-glucuronidase está presente em 97% das cepas de E. coli, porém poucas E. coli podem ser negativas. 2. Certas espécies de Salmonella são positivas para ß-glucuronidase. 3. Algumas espécies podem apresentar baixo crescimento devido a variações nutricionais. Desempenho e Avaliação O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções do rótulo dentro do prazo de validade, quando armazenado na temperatura recomendada. Controle de qualidade Aparência Pó de fluxo livre homogêneo de creme a amarelo Gelatinoso Firme, comparável com gel de ágar a 1,5% Cor e clareza do meio preparado Formas de gel amarelo claro a ligeiramente opalescente em placas de Petri Reação Reação de solução aquosa 3,66% p / v a 25 ° C. pH: 7,2 ± 0,2 pH 7,00-7,40 Resposta Cultural Características culturais observadas após uma incubação a 44 ° C por 18-24 horas Organismo Inóculo (CFU) Crescimento Recuperação Cor da Colônia Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) 50-100 luxuriant >=50% verde azulado Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*) 50-100 luxuriant >=50% incolor Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC >=104 inibido 0% 25923 (00034*) Chave: * Números WDCM correspondentes Armazenamento e vida útil Armazenar entre 15-25 ° C em um recipiente bem fechado e o meio preparado entre 2-8 ° C. Use antes da data de validade na etiqueta. Na abertura, o produto deve ser armazenado adequadamente seco, após tampar bem o frasco para evitar a formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazene em área ventilada e seca protegida de extremos de temperatura e fontes de ignição. Sele o recipiente hermeticamente após o uso. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do período de validade declarado. Disposição O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclavagem e / ou incineração das preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Seguir os procedimentos laboratoriais estabelecidos para o descarte de materiais infecciosos e o material que entra em contato com a amostra clínica deve ser descontaminado e descartado de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (5,6). Referencia: 1.Anderson J.M. and Baird-Parker A.C., (1975), J. Appl. Bact., 39:111. 2.Hansen W. and Yourassawsky E.,(1984), J.Clin. Microbiol., 20:1177. 3. International Standard ISO 16649-2: 1999. Microbiology of food and animal feeding stuffs- Horizontal method for the enumeration of ß-glucuronidase-positive Escherichia coli. 4..Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 2nd Editio 5. Jorgensen,J.H., Pfaller , M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1 6. Salfinger Y., and Tortorello M.L. Fifth (Ed.),2001, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 5th Ed., American Public Health Association, Washington, D.C.