Meio sim frasco 500g

O Meio SIM é recomendado para a determinação da produção de sulfeto de hidrogênio, formação de indol e motilidade de bacilos. Composição** Ingredientes Gms / Litro HM Peptona B # 3.000 Peptona 30.000 Ferro peptonizado 0,200 Tiossulfato de sódio 0,025 Agar 3.000 PH final (a 25 ° C) 7,3 ± 0,2 ** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho # - Equivalente ao extrato de carne bovina Instruções Suspenda 36,23 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Dispensar em tubos. Esterilizar autoclavando a 15 libras de pressão (121 ° C) por 15 minutos. Deixe os tubos esfriarem na posição vertical. Princípio e Interpretação O SIM SIM é usado para diferenciar bacilos entéricos, particularmente Salmonella e Shigella, com base na produção de sulfeto, formação de indol e motilidade (1, 2). Jordan e Victorson (3) relataram que Salmonella Paratyphi A e Paratyphi B podem ser distinguido com base na produção de H2S usando acetato de chumbo. Sulkin e Willett (4) usaram Ágar Triplo de Açúcar e Ferro com 1% ágar por motilidade juntamente com a produção de H2S e fermentação de carboidratos. Sosa (5) descreveu um meio peptona com baixa ágar para determinação da motilidade e indole. O SIM Medium permite a determinação de três características pelas quais as bactérias entéricas podem ser diferenciadas. Ferro peptonizado e tiossulfato de sódio são os indicadores da produção de H2S. Este H2S reage com ferro peptonizado para formar precipitado preto de sulfureto ferroso (4, 5). Organismos móveis intensificam a reação H2S. Organismos móveis crescem longe da linha de inoculação mostrando crescimento difuso enquanto organismos não móveis crescem ao longo da linha da facada. A detecção de motilidade é possível devido à natureza semi-sólida do meio. O crescimento que irradia da linha central da haste indica que o organismo em teste é móvel. A peptona B e a peptona HM fornecem compostos nitrogenados e carbonáceos, aminoácidos de cadeia longa, vitaminas e outros nutrientes essenciais. O triptofano da peptona é degradado por bactérias específicas para produzir indol (2). O indole é detectado por a adição de reagentes químicos após o período de incubação. Inocule a cultura fresca com uma única facada, usando uma agulha reta no centro do meio. Após a incubação, observar a motilidade (crescimento difuso para fora da linha pontilhada ou turbidez no meio) e a produção de H2S (escurecimento do meio). Para detectar a produção de indol, adicione três ou quatro gotas de reagente Kovacs (2) e observe desenvolvimento de cor vermelha (reação positiva). Determinar a motilidade e a produção de H2S antes da determinação da produção de indol. Tipo de amostra Isolado de cultura pura Coleta e manuseio de amostras: Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. Aviso e precauções: Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / vestuário de proteção / proteção ocular / proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão conforme diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio das amostras. As diretrizes de segurança podem ser consultadas em fichas de dados de segurança individuais Limitações: Este meio é um meio de uso geral e pode não suportar o crescimento de organismos exigentes. Desempenho e Avaliação O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro do prazo de validade quando armazenado em temperatura recomendada. Controle de qualidade Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo creme a bege Gelificação: Semi-sólido, comparável ao gel de agar a 0,3%. Cor e clareza do meio preparado: Formas de gel ligeiramente opalescente de cor âmbar média em tubos como pontas Reação: Reação de solução aquosa a 3,6% p / v a 25 ° C. pH: 7,3 ± 0,2 pH: 7,10-7,50 Resposta cultural M181: Características culturais observadas após uma incubação a 35-37 ° C por 18-24 horas. Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Motilidade: Positivo, crescimento longe da linha pontilhada causando turbidez Produção de Indol (além da adição de Kovac): Reação Positiva, anel vermelho na interface do meio H2S: Reação Negativa Organismo: Salmonella Typhimurium ATCC 14028 (00031*) Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Motilidade: Positivo, crescimento longe da linha pontilhada causando turbidez Produção de Indol (além da adição de Kovac): Reação Negativa H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio Organismo: Shigella flexneri ATCC 12022 (00126*) Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Motilidade: Negativo, o crescimento ao longo da linha da facada, o meio circundante permanece claro Produção de Indol (além da adição de Kovac): Reação Negativa H2S: Reação Negativa Organismo: Salmonella Paratyphi A ATCC 9150 Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Motilidade: Positivo, crescimento longe da linha pontilhada causando turbidez Produção de Indol (além da adição de Kovac): Reação Positiva, anel vermelho na interface do meio H2S: Reação Negativa Organismo: Salmonella Paratyphi B Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Motilidade: Positivo, crescimento longe da linha pontilhada causando turbidez Produção de Indol (além da adição de Kovac): Reação Negativa H2S: Reação Positiva, com escurecimento do meio Organismo: Klebisiella Pneumoniae ATCC 13883 (00097*) Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Motilidade: Negativo, o crescimento ao longo da linha da facada, o meio circundante permanece claro Produção de Indol (além da adição de Kovac): Reação Negativa H2S: Reação Negativa Armazenamento e prazo de validade Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 2-8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, depois de fechar bem o frasco para evitar formação de caroços devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em local seco área ventilada protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche o recipiente firmemente após o uso. Use antes da data de validade no rótulo. O desempenho do produto é melhor se usados dentro do prazo de validade indicado. Descarte O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e / ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (6,7). Referências 1. MacFaddin J. F., 1985, Media para Isolamento-Cultivo-Identificação-Manutenção de Bactérias Médicas, vol. 1, Williams e Wilkins, Baltimore. 2. Ewing W. H., 1986, Edwards e Ewings Identification of Enterobacteriaceae, 4ª Ed., Elsevier Science Publishing Co., Inc. Nova Iorque. 3. Jordan E. O. e Victorson R., 1917, J. Inf. Dis., 21: 554. 4. Sulkin S. E. e Willett J. C., 1940, J. Lab. Clin. Med. 25: 649. 5. Sosa L., 1943, Rev. Inst. Bacteriol., 11: 286 6.Isenberg, H.D. Procedimentos Clínicos de Microbiologia. 2ª Edição. 7. Jorgensen, J. H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M. L., Richter, S. S. e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1