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Caldo mr-vp granulado frasco 500g
Código: AG-6013
Marca: HIMEDIA
Apresentação: 1 unidade
Meio de cultura liofilizado para testes de Vermelho de Metil (MR) e Voges-Proskauer (VP), auxiliando na identificação de enterobactérias.
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Informações técnicas do produto
Caldo mr-vp granulado frasco 500g
Caldo MR-VP (Caldo fosfato de glicose), (Caldo Glicose tamponado) – Granulado (GM070) O Caldo MR-VP Granulado, é recomendado para o desempenho do vermelho de metila e da Voges-Proskauer testes de diferenciação do grupo coli-aerogenes. Composição** Ingredientes (g/L) Peptona tamponada 7.000 Dextrose 5.000 Fosfato dipotássico 5.000 PH final (a 25°C) 6,9 ± 0,2 ** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho Instruções Suspenda 17 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça se necessário para dissolver completamente o meio. Distribuir em tubos de ensaio em quantidades de 10 ml e esterilize em autoclave a 15 lbs de pressão (121°C) por 15 minutos. Princípio e Interpretação Metil Red e Voges-Proskauer estão entre os dois testes utilizados na identificação bioquímica de bactérias espécies. Esses testes foram originalmente estudados por Voges, Proskauer (1) e posteriormente por Clark e Lubs (2) para diferenciar entre os membros do grupo cologerógenos. Ambos os testes baseiam-se na detecção de produtos específicos de desagregação de metabolismo de carboidratos. Todos os membros de Enterobacteriaceae são, por definição, fermentadores de glicose. No caldo MR-VP, após 18-24 horas de incubação, a fermentação produz subprodutos metabólicos ácidos. Portanto inicialmente todos os entéricos darão uma reação de RM positiva se testados (3, 4, 5). Contudo, após uma incubação adicional, exigida pelo procedimento de teste (2-5 dias), os organismos positivos para RM continuam a produzir , resultando em um pH baixo (ácido) que supera o sistema tampão de fosfato e mantém um ambiente ácido o meio (pH 4,2 ou menos). Organismos negativos para RM metabolizam ainda mais os produtos de fermentação inicial por descarboxilação produzir acetil metilcarbinol neutro (acetoína), o que resulta em menor acidez no meio e eleva o pH em direção à neutralidade (pH 6,0 ou superior) (6). Na presença de oxigênio atmosférico e álcalis, os produtos finais neutros, acetoína e 2, 3- O butanodiol é oxidado em diacetil, que reage com a creatina para produzir uma cor vermelha. O teste de vermelho de metila (MR) é realizado após 5 dias de incubação a 30 ° C (8). As culturas do teste de Voges-Proskauer (VP) são incubado a 30 ° C por 24-48 horas (9). Vários procedimentos de teste foram sugeridos para a realização do teste de VP por Werkman (10), OMeara (11) Levine et al (12) e Voughn et al (8). Teste de Werkmans (10): Adicione 2 gotas de uma solução a 2% de cloreto férrico a 50 ml de cultura e 5 ml de hidróxido de sódio a 10%. Agite o tubo para misturar bem. A cor estável do cobre que se desenvolve em poucos minutos é uma reação positiva. Teste OMeara (11): Adicione 25 mg de creatina sólida a 5 ml de cultura e adicione 5 ml de hidróxido de sódio concentrado (40%). Vermelho. O desenvolvimento da cor em alguns minutos após agitar bem o tubo é uma reação positiva. Levine, Epstein e Voughn (12) modificaram a técnica OMeara dissolvendo a creatina em uma solução concentrada de potássio hidróxido (R031, reagente OMeara). Voughn, Mitchell e Levine (8) recomendaram o método de Barritt (13) como adição de 1 ml de Reagente Barritt B (R030 - hidróxido de potássio a 40%) e 3 ml de Reagente Barritt A (R029 - a-naftol a 5% em absoluto etanol) a 5 ml de cultura. O teste positivo é indicado pela cor rosa eosina dentro de 2-5 minutos. Os testes de RM e VP não devem ser considerados como o único meio de diferenciar E.coli da Klebsiella - Grupos Enterobacter. Ocasionalmente, também um organismo positivo conhecido como acetoína falha em dar uma reação positiva à PV. Superar nesta possibilidade, aqueça suavemente a cultura que contém os reagentes VP (7). Controle de qualidade Aparência: Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre Cor e clareza do meio preparado: Solução clara de cor amarela clara, sem precipitado Reação: Reação de solução aquosa a 1,7% p / v a 25°C. pH: 6,9 ± 0,2 pH: 6.70-7.10 Resposta cultural M070: Características culturais observadas após uma incubação a 30-32°C por 18-48 horas. Resposta cultural Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Teste MR: Reação Positiva, cor vermelha brilhante Teste VP: Reação Negativa Organismo: Enterobacter aerogenes ATCC 13048 Inoculação: 50-100 Crescimento: Reação Negativa Teste MR: Reação Negativa Teste VP: Reação Positiva, eosina cor de rosa / vermelho dentro de 2-5 minutos Organismo: Klebisiella pneumoniae ATCC 23357 Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Teste MR: Reação Negativa Teste VP: Reação Positiva, eosina cor de rosa / vermelho dentro de 2-5 minutos Armazenamento e prazo de validade Armazenar abaixo de 30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 2-8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Referências: 1.Voges O. e Proskauer B., 1898, Z. Hyg. Infektionskr., 28:20. 2. Clark W.M. e Lubs H.K., 1915, J. Infect. Dis., 17: 160. 3. Barry A. L., Bernsohn K. L., Adams A. B., Thrup L. D., Appl. Microbiol., 1970, 20 (6), 866-870. 4.Branson D., Methods in Clinical Bacteriology, Springerfield, IL: Charles C Thomas, 1972, 32-33. 5.Cowan S.T., Cowan e Stuls Manual para a Identificação de Bactérias Médicas, 2ª Ed., Cambridge, Cambridge University Press, 1974, 37,48. 6.MacFaddin J.F., 2000, Testes bioquímicos para identificação de bactérias medicinais, 3ª Ed., Lippincott, Williams e Wilkins, Baltimore. 7. MacFaddin J. F., 1985, Meios para Isolamento-Cultivo-Identificação-Manutenção de Bactérias Médicas, vol. 1, Williams e Wilkins, Baltimore. 8. Vaughn R. H., Mitchell N. B. e Levine M., 1939, J. Am. Water Works Association, 31: 993. 9. Ruchhoft C. C., Kallas J. G., Chinn B. e Coulter E. W., 1931, J. Bacteriol., 22: 125. 10.Werkman C.H., 1930, J. Bact., 20: 121. 11.OMeara R. A. Q., 1931, J. Path. Bacteriol., 34: 401. 12.Levine M., Epstein S. S. e Voughn R. H., 1934, Am. J. Publ. Health, 24: 505. 13.Ewing W.H., 1986, Edwards e Ewings Identification of Enterobacteriaceae, 4a Ed., Elsevier Science Publishing Co., Inc., Nova Iorque.
