Caldo lisina decarboxilase frasco 500g

CALDO LISINA DESCARBOXILASE - (M376) USO PRETENDIDO Recomendado para diferenciar Salmonella arizonae do grupo Bethesda-Ballerup de Enterobacteriaceae. COMPOSIÇÃO ** Ingredientes (g/L) Peptona: 5.000 Extrato de levedura: 3.000 Dextrose (glicose): 1.000 Cloridrato de L-Lisina: 5.000 Purpura de bromocresol: 0.020 Ágar: 15.000 pH Final (a 25°C): 6.8 ±0.2 **Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho INSTRUÇÕES Suspender 14,02g em 1000mL de água purificada/destilada. Aqueça, se necessário, para dissolver o meio completamente. Dispense uma quantidade de 5mL em tubos de ensaio com tampa de rosca. Esterilize em autoclave a 15 lbs de pressão (121°C) por 15 minutos. Arrefecer o meio entubado na posição vertical e cobrir com 2mL - 3mL de óleo mineral estéril. PRINCÍPIO E INTERPRETAÇÃO Meios de descarboxilase foram descritos pela primeira vez por Moeller (7,8,9) para detectar lisina e ornitina descarboxilase e arginina dihidrolase. A Falkow desenvolveu um meio de lisina descarboxilase para a identificação e diferenciação de Salmonella e Shigella (4). O Caldo Lisina Descarboxilase é especialmente adequado para estudar as reações de descarboxilase para membros de Enterobacteriaceae exceto Klebsiella e Enterobacter. O caldo de lisina descarboxilase também é recomendado pela APHA (5,6) e outros métodos padrão (5,3). Durante os estágios iniciais de incubação, após a inoculação, a fermentação da dextrose pelos organismos leva à produção de ácido, o que causa uma mudança de cor subsequente do indicador púrpura de bromocresol para amarelo. A condição ácida assim gerada estimula a atividade da descarboxilase, que leva à descarboxilação da lisina em cadaverina. As condições alcalinas geradas pela produção de cadaverina fazem com que o indicador púrpura de bromocresol (alterado para amarelo) volte à cor púrpura. Se os organismos não produzem a enzima descarboxilase, a cor do meio permanece amarela. Que não usa a Dextrose não apresentarão qualquer alteração na cor do meio. Use inóculos leves e não leia os testes após 24 horas de incubação, pois alguns organismos requerem um tempo de incubação maior de até 4 dias. TIPO DE AMOSTRA Amostras de alimentos; Amostras de água. COLETA E MANUSEIO DE AMOSTRAS Para amostras de alimentos, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras de acordo com as diretrizes (10). Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta de amostras, processamento de acordo com as diretrizes e padrões locais (1). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. AVISO E PRECAUÇÕES Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / roupas de proteção / proteção de olhos / proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser referidas em fichas de dados de segurança individuais. LIMITAÇÕES 1. Use inóculo leve e não leia os testes após 24 horas de incubação, pois alguns organismos requerem tempo de incubação maior de até 4 dias. DESEMPENHO E AVALIAÇÃO O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções no rótulo dentro do período de validade e quando armazenado na temperatura recomendada. CONTROLE DE QUALIDADE Aparência: Pó homogêneo de fluxo livre de amarelo claro a amarelo esverdeado - Cor e clareza do meio preparado: Solução clara de cor púrpura sem qualquer precipitado - Reação: Reação de 1.4% p/v em solução aquosa a 25°C. pH: 6.8 ±0.2 - Resposta cultural: Características culturais observadas após uma incubação a 35-37°C por 18-24 horas. (Os tubos inoculados são cobertos com óleo mineral). Organismos: Citrobacter freundii ATCC 8090 Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação variável Organismos: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação variável Organismos: # Klebsiella aerogenes ATCC 13048 (00175*) Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação positiva, cor roxa Organismos: Klebsiella pneumoniae ATCC 13883 (00097*) Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação positiva, cor roxa Organismos: Proteus mirabilis ATCC 25933 Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação negativa, cor amarela Organismos: Proteus vulgaris ATCC 13315 Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação negativa, cor amarela Organismos: Salmonella Arizonae ATCC 13314 Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação positiva, cor roxa Organismos: Salmonella Paratyphi A ATCC 9150 Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação negativa, cor amarela Organismos: Salmonella Typhi ATCC 6539 Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação positiva, cor roxa Organismos: Serratia marcescens ATCC 8100 Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação positiva, cor roxa Organismos: Shigella dysenteriae ATCC 13313 Inóculo(UFC): 50-100 Lisina descarboxilase: Reação negativa, cor amarela Chave: * Números WDCM correspondentes (#). Anteriormente conhecido como Enterobacter aerogenes ARMAZENAMENTO E VIDA ÚTIL Armazene entre 10°C e 30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado entre 15°C - 25°C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser devidamente armazenado seco, após tampar bem o frasco para evitar formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de grumos. Armazenar em área ventilada e seca protegida de extremos de temperatura e fontes de ignição. Feche bem o recipiente após o uso. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade. DESCARTE O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Seguir os procedimentos laboratoriais estabelecidos para o descarte de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra devem ser descontaminados e descartados de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (5,6). REFERÊNCIAS 1. Baird R.B., Eaton A.D., and Rice E.W., (Eds.), 2015, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 23rd ed., APHA, Washington, D.C. 2. Eaton A. D., Clesceri L. S., Rice E. W. and Greenberg A. W., (Eds.), 2005, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater, 21st Ed., APHA, Washington, D.C. 3. FDA Bacteriological Analytical Manual, 2017, AOAC, Washington, DC. 4. Falkow, 1958, Am. J. Clin. Pathol., 29:598. 5. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook 2nd Edition. 6. Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1. 7. Moeller V., 1954, Acta. Pathol. Microbiol. Scand., 34:102. 8. Moeller V., 1954, Acta. Pathol. Microbiol. Scand., 34:259. 9. Moeller V., 1955, Acta. Pathol. Microbiol. Scand., 36:158. 10. Salfinger Y., and Tortorello M.L., 2015, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods,5th Ed., American Public Health Association, Washington, D.C.