Caldo de mossel frasco 500g

CALDO EE, MOSSEL (M287) USO PRETENDIDO Recomendado para o enriquecimento seletivo de Enterobacteriaceae no exame bacteriológico de alimentos. COMPOSIÇÃO Ingredientes (g/L) Peptona: 10.000 Dextrose (Glicose): 5.000 Hidrogenofosfato dissódico: 6.450 Dihidrogenofosfato de potássio: 2.000 Bile purificada#: 20.000 Verde brilhante: 0.0135 pH final (a 25°C): 7.2 ± 0.2 # Equivalente a bile de boi, purificada **Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho INSTRUÇÕES Suspender 43,46g em 1000mL de água purificada/destilada. Dispensar em tubos ou frascos conforme desejado. Rolha com tampões de algodão ou tampas soltas. Aqueça em vapor livre ou água fervente por 30 minutos. Evite o superaquecimento do meio. NÃO AUTOCLAVE. PRINCÍPIO E INTERPRETAÇÃO A família Enterobacteriaceae consiste em Salmonella, Shigella e outros patógenos entéricos. Esses organismos entram no sistema alimentar através da água contaminada com fezes. A maioria desses organismos pode ser eliminada sob os rigorosos parâmetros de processamento de alimentos. Mas alguns desses organismos podem se tornar subletalmente feridos durante as mudanças no pH, exposição ao vapor ou calor e outras condições desfavoráveis (1). Portanto, o aspecto importante do monitoramento alimentar depende da identificação e enumeração dessas células lesadas, após a ressuscitação. O caldo EE, Mossel, formulado por Mossel et. al. (2) é recomendado como meio de enriquecimento para Enterobacteriaceae no exame biológico de alimentos (2) e alimentos para animais (3). A peptona e a dextrose fornecem os nutrientes essenciais necessários para o crescimento da maioria dos membros das Enterobacteriaceae. Verde brilhante e Bile, purificada, inibem o crescimento de bactérias gram-positivas. As Enterobacteriaceae lactose-negativas, anaerógenas lactose-positivas ou de fermentação tardia da lactose são muitas vezes perdidas pelo teste padrão de coli-aerogenes. Para superar esse problema, a lactose é substituída por dextrose nesses meios. Os fosfatos formam o sistema tampão do meio. As células danificadas durante a secagem ou pH baixo são ressuscitadas em caldo triptona de soja (M011) bem aerado por 2 horas a 25°C antes do enriquecimento em caldo EE. O procedimento de reanimação é recomendado para alimentos secos (4), ração animal (5) e alimentos semiconservados (6). O Caldo EE é um caldo de enriquecimento e deve ser usado em conjunto com o Ágar Bile Vermelho Violeta Glicose (M581). As subculturas devem ser feitas em meio diferencial de lactose, como o Ágar MacConkey (M081), Ágar Citrato Desoxicolato (M065) ou Ágar Verde Brilhante (M016) para a detecção de lactose negativa ou fermentadores retardados de lactose. Isso é usado para inocular tubos NMP preparados com EE Broth. Inocule uma alça desses tubos em Ágar Bile Vermelho Violeta Glicose (M581) após uma incubação inicial a 35°C - 37°C por 24 horas. Colônias rosa típicas de M581 são subcultivadas para confirmação bioquímica por reações de oxidação e fermentação (7). Diluições decimais do homogeneizado de alimentos são usadas se as contagens esperadas forem altas ou então a suspensão inicial é usada. Caldo EE, Mossel (M287). TIPO DE AMOSTRA Amostras de alimentos COLETA E MANUSEIO DE AMOSTRAS Para amostras de alimentos, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras de acordo com as diretrizes (8). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. AVISOS E PRECAUÇÕES Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/ vestuário de proteção/ proteção ocular/ proteção facial. LIMITAÇÕES Evite o superaquecimento do meio, pois o meio é sensível ao calor. DESEMPENHO E AVALIAÇÃO O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções no rótulo dentro do período de validade quando armazenado na temperatura recomendada. CONTROLE DE QUALIDADE Aparência: Pó homogêneo de fluxo livre de amarelo claro a amarelo esverdeado Cor e clareza do meio preparado: Solução clara, de cor verde esmeralda, sem precipitado Reação: pH de 4,35% p/v em solução aquosa a 25°C. pH 7,00-7,40 pH: 7,00-7,40 Resposta cultural: A resposta da cultura foi observada após uma incubação a 35°C - 37°C durante 24-48 horas. Organismo: Escherichia coli ATCC 8739 (00012*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Ácido: Reação positiva, cor amarela Organismo: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027(00026*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Ácido: Reação negativa, sem mudança de cor Organismo: Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 6538 (00032*) Inóculo (UFC): >=10^4 Crescimento: Inibido Ácido: - Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Ácido: Reação positiva, cor amarela Organismo: Escherichia coli NCTC 9002 Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Ácido: Reação positiva, cor amarela Organismo: Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 (00025*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Ácido: Reação negativa, sem mudança de cor Organismo: # Klebsiella aerogenes ATCC 13048 (00175*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Ácido: Reação positiva, cor amarela Organismo: Proteus mirabilis ATCC 25933 Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Ácido: Reação positiva, cor amarela Organismo: Salmonella Enteritidis ATCC 13076 (00030*) Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Ácido: Reação variável Organismo: Shigella boydii ATCC 12030 Inóculo (UFC): 50 -100 Crescimento: Abundante Ácido: Reação negativa Organismo: Staphylococcus aureus subsp.aureus ATCC 25923 (00034*) Inóculo (UFC): >=10^4 Crescimento: Inibido Ácido: - Chave: (*) Números WDCM correspondentes. (#) Anteriormente conhecido como Enterobacter aerogenes ARMAZENAMENTO Armazene entre 10°C - 30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado entre 15°C - 25°C. Use antes da data de validade no rótulo. Ao abrir, o produto deve ser armazenado adequadamente seco, após tampar bem o frasco para evitar a formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de grumos. Armazene em área seca e ventilada, protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche bem o recipiente após o uso. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade. DESCARTE O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Siga os procedimentos laboratoriais estabelecidos no descarte de materiais infecciosos e o material que entrar em contato com a amostra deve ser descontaminado e descartado de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (9,10). REFERÊNCIAS 1.Mossel D. A. A., and Harrewijn G. A., 1972, Alimenta II, 29-30. 2.Mossel D. A. A., Vissar M. and Cornellisen A. M. R., 1963, J. Appl.Bacteriol., 26(3):444. 3.Van Schothurst M. et al, 1966, Vet Med., 13(3):273. 4.Mossel D. A. A. and Ratto M. A., 1970, Appl. Microbiol., 20:273. 5.Mossel D. A. A., Shennan J. L. and Clare V., 1973, J. Sci. Fd. Agric., 24: 499. 6.Mossel D. A. A. and Ratto M. A., 1973, J. Food Technol., 8: 97. 7.International Organization for Standardization (ISO), 1993, Draft ISO/DIS 7402. 8.Salfinger Y., and Tortorello M.L., 2015, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 5th Ed., American Public Health Association, Washington, D.C. 9.Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook 2nd Edition. 10.Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.