Agar verde brilhante modificado frasco 500g

O Ágar Base Verde Brilhante é utilizado para o isolamento seletivo de Salmonellae, exceto Salmonella Typhi, das fezes e outros materiais. Composição** Ingredientes Gms / Litro Peptona protéica 10.000 Extrato de levedura 3.000 Lactose 10.000 Sacarose 10.000 Cloreto de sódio 5.000 Vermelho de fenol 0,080 Verde brilhante 0,0125 Agar 20.000 PH final (a 25 ° C) 6,9 ± 0,2 ** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho. Instruções Suspenda 29,0 gramas em 500 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Esterilizar em autoclave a 15 libras de pressão (121 ° C) por 15 minutos. EVITE O SUPERAQUECIMENTO. Arrefecer até 45-50 ° C. Para mais seletividade, assepticamente adicione o conteúdo reidratado de 1 frasco para injetáveis de Sulfa Suplemento (FD068). Misture bem antes de despejar em placas de Petri estéreis. Princípio e Interpretação As espécies de Salmonella causam muitos tipos de infecções, desde gastroenterites leves e autolimitadas até febre tifóide com risco de vida. A forma mais comum da doença de Salmonella é a gastroenterite autolimitada, com febre com duração inferior a 2 dias e diarréia.Com duração de menos de 7 dias. Base de Agar Verde Brilhante, Modificada, como meio de revestimento primário para isolamento de Salmonella foi descrita pela primeira vez por Kristensen et. al. (1) e posteriormente modificado por Kauffmann (2). O ágar verde brilhante também é recomendado pela APHA (3,4) FDA (5) e descrito em EP, BP e IP (6,7,8). Este meio contém verde brilhante, que inibe o crescimento da maioria das bactérias Gram-negativas e Gram-positivas. Salmonella Typhi, Shigella, Escherichia coli, Pseudomonas, Staphylococcus aureus são inibidas principalmente. As amostras clínicas podem ser diretamente revestidas neste meio. No entanto, sendo altamente seletivo, recomenda-se que este meio deve ser usado junto com um meio menos inibitório para aumentar as chances de recuperação. Muitas vezes, culturas enriquecidas com caldo de Selenito ou Tetrationato é banhado em ágar verde brilhante junto com ágar de sulfito de bismuto, ágar SS, MacConkey Agar. O meio contém peptona proteica e extrato de levedura como fontes de carbono, nitrogênio, vitaminas, aminoácidos e nutrientes. Os dois açúcares, a lactose e a sacarose, servem como fontes de energia. Fermentação de lactose e / ou sacarose no O meio resulta na formação de pH ácido que é detectado pelo indicador vermelho de fenol. O cloreto de sódio mantém a equilíbrio osmótico. O verde brilhante ajuda a inibir a microflora contaminante. O meio pode suplementar ainda mais com sulfacetamida (1g / l) e mandelato de sódio (0,25g / l) para inibir microorganismos contaminantes quando a amostra é suspeita-se que contenha grande número de organismos concorrentes, juntamente com espécies de Salmonella. As bactérias fermentadoras não lactose desenvolvem colônias brancas a rosadas dentro de 18 a 24 horas após a incubação. Tipo de amostra Clínico: fezes; Alimentos; Amostras de água; Amostras farmacêuticas Coleta e manuseio de amostras Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo com as diretrizes estabelecidas (12,13). Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com a diretriz es (3,9,11). Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta, processamento de acordo com as diretrizes e os normas (10). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. Aviso e Precauções Apenas para diagnóstico in vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / roupas de proteção / proteção para os olhos / proteção para o rosto. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser referidas nas fichas de dados de segurança individuais. Limitações 1. Embora este meio seja seletivo para Salmonella, outras espécies de Enterobacteriaceae podem crescer. 2. As espécies de Salmonella Typhi e Shigella podem não crescer neste meio. 3. Além disso, as espécies Proteus, Pseudomonas e Citrobacter podem imitar patógenos entéricos produzindo pequenas colônias vermelhas. 4. Mais confirmação deve ser realizada em isolados presuntivos de Salmonella. Coleta e manuseio de amostras Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo com as diretrizes estabelecidas (12,13). Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com a diretriz es (3,9,11). Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para coleta, processamento de acordo com as diretrizes e os normas (10). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. Desempenho e Avaliação A performance do meio é esperada quando usada conforme a direção na etiqueta dentro do prazo de validade quando armazenada em temperatura recomendada. Controle de qualidade Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo amarelo claro a rosa clara Gelificação: Firme, comparável ao gel de ágar a 2,0%. Cor e clareza do meio preparado: Gel esverdeado castanho a ligeiramente opalescente se forma em placas de Petri. Reação: Reação de solução aquosa a 5,8% p / v a 25 ° C. pH: 6,9 ± 0,2 pH: 6.70-7.10 Resposta cultural A resposta cultural foi realizada após uma incubação a 30-35 ° C por 24-48 horas. A taxa de recuperação é considerada 100% para crescimento de bactérias no ágar de digestão de caseína de soja. Resposta cultural Organismo ATCC Inoculação Crescimento Recuperação Cor da Colônia Escherichia coli 25922 (00013*) 50-100 Nenhum 0-10% Amarelo esverdeado Escherichia coli 8739 (00012*) 50-100 Nenhum 0-10% Amarelo esverdeado Escherichia coli NCTC 9002 50-100 Nenhum 0-10% Amarelo esverdeado Staphylococcus aureus 25923 (00034*) >=10³ Inibido 0% - Staphylococcus aureus 6538 (00032*) >=10³ Inibido 0% - Salmonella Typhi 6539 50-100 Justo-Bom 30-40% Rosa avermelhado Salmonella Typhimurium 14028 (00031*) 50-100 Bom-Exuberante >=50% Branco rosado Salmonella Enteritidis 13076 (00030*) 50-100 Exuberante >=50% Branco rosado Salmonella Abony 6017 (00029*) 50-100 Bom-Exuberante >=50% Branco rosado Armazenamento e prazo de validade Armazenar abaixo de 30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 2-8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Em abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, depois de fechar firmemente a garrafa, a fim de evitar a formação de caroços devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em área ventilada e seca protegido de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche o recipiente firmemente após o uso. Use antes da data de validade em o rótulo. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado. Descarte O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (12,13). Referências 1. Kristensen M., Lester V e Jurgens A., 1925, Brit.J.Exp.Pathol., 6: 291. 2. Kauffman F., 1935, Seit F. Hyg. 177: 26. 3. Salfinger Y. e Tortorello M.L. Quinta (Ed.), 2015, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de Foods, 5th Ed., Associação Americana de Saúde Pública, Washington, D.C. 4. Métodos padrão para o exame microbiológico de produtos lácteos, 1995, 19a Ed, APHA, Washington, D.C. 5. Bacteriological Analytical Manual, 5ª Ed. 1978, AOAC, Washington DC. 6. Farmacopeia Europeia, 2008, Conselho ou Europa, Estrasburgo. 7. The British Pharmacopoeia, 2008 vol. II, Londres. 8. Farmacopeia Indiana, 2010, Ministério da Saúde e Bem-Estar Familiar, Governo da Índia, 9. American Public Health Association, Métodos Padrão para o Exame de Produtos Lácteos, 1978, 14ª Ed., Washington DC. 10. Wehr H. M. e Frank J. H., 2004, Métodos Padrão para o Exame Microbiológico de Produtos Lácteos, 17ª Ed., APHA Inc., Washington, D.C. 11. Baird R.B., Eaton A.D. e Rice E.W., (Eds.), 2015, Métodos padrão para o exame de água e águas residuais, 23a ed., APHA, Washington, D.C. 12. Issenberg, H.D. Procedimentos Clínicos de Microbiologia. 2ª Edição. 13. Jorgensen, J. H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M. L., Richter, S. S. e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1