Agar Mac Conkey com cristal violeta frasco 500g

Ágar MacConkey com 0,15% de sais biliares, CV e NaCl Uso pretendido: Para o isolamento seletivo e a diferenciação de organismos coliformes e outros patógenos entéricos de amostras clínicas e não clínicas. Composição** Ingredientes g / L Peptona de gelatina - 17.000 Triptona - 1.500 Peptona - 1.500 Lactose - 10.000 Sais biliares - 1.500 Cloreto de sódio - 5.000 Vermelho neutro - 0,030 Cristal violeta - 0,001 Ágar - 15.000 pH final (a 25°C) 7,1±0,2 **Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho Instruções: Suspenda 51,53 gramas em 1.000 ml de água purificada/destilada. Aqueça até a ebulição com agitação suave para dissolver completamente o ágar. Esterilize em autoclave a 121°C (15 libras de pressão) por 15 minutos. Evite o superaquecimento. Resfrie a 45-50°C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis. A superfície do meio deve estar seca quando inoculada. Princípio e interpretação: Os ágares MacConkey são meios de plaqueamento ligeiramente seletivos e diferenciais usados principalmente para a detecção e o isolamento de organismos gramnegativos de fontes clínicas (1), lácteas (2), alimentícias (3,4), hídricas (5), farmacêuticas (6,7) e industriais (8). É também é recomendado para a seleção e recuperação de Enterobacteriaceae e bacilos gram-negativos entéricos relacionados. A USP recomenda esse meio para uso na realização de Testes de Limite Microbiano (7). Esses meios de ágar são seletivos, pois a concentração de sais biliares, que inibem os microrganismos gram-positivos, é baixa em comparação com outros meios de plaqueamento entérico. O meio M081, que corresponde ao recomendado pela APHA, pode ser usado para o plaqueamento direto de amostras de água para bacilos coliformes, para o exame de amostras de alimentos para organismos de intoxicação alimentar (4) e para o isolamento de espécies de Salmonella e Shigella em queijo (2). Além disso, esse meio também é utilizado para a contagem de bactérias coli-aerogenes em fezes de bovinos e ovinos (9), a contagem de coli-aerogenes e fermentadores de não lactose em carcaças de aves (9), contagens bacterianas em frango picado enlatado irradiado (10) e o reconhecimento de bactérias coliaerogenes durante investigações sobre o gênero Aeromonas (11,12). O ágar MacConkey é o meio seletivo e diferencial mais antigo para o cultivo de microrganismos entéricos de uma variedade de amostras clínicas (13,14). O meio original contém proteína, sais biliares, cloreto de sódio e dois corantes. A ação seletiva desse meio é atribuída à violeta cristal e aos sais biliares, que são inibidores da maioria das espécies de bactérias gram-positivas. As bactérias gram-negativas geralmente crescem bem no meio e são diferenciadas por sua capacidade de fermentar a lactose. As cepas fermentadoras de lactose crescem como colônias vermelhas ou rosadas e podem ser circundadas por uma zona de bile precipitada por ácido. A cor vermelha se deve à produção de ácido a partir da lactose, à absorção do vermelho neutro e à subsequente mudança de cor do corante quando o pH do meio cai abaixo de 6,8. As cepas não fermentadoras de lactose, como Shigella e Salmonella, são incolores, transparentes e normalmente não alteram a aparência do meio. Peptona, triptona e peptona de gelatina são fontes de nitrogênio, carbono, aminoácidos de cadeia longa e outros nutrientes. A lactose é um carboidrato fermentável, o cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. Os sais biliares e o cristal violeta são agentes seletivos que inibem o crescimento de organismos gram positivos. O vermelho neutro é o corante indicador de pH. Tipo de amostra: Clínico - fezes, urina etc., alimentos e amostras de laticínios, amostras de água Coleta e manuseio de espécimes: Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio de espécimes de acordo com as diretrizes estabelecidas (1,15). Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para a coleta e o processamento de amostras de acordo com as diretrizes (2,4). Para amostras de água, siga as técnicas apropriadas para a coleta e o processamento de amostras de acordo com as diretrizes e os padrões locais (5). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. Advertências e precauções: Uso em diagnóstico in vitro. Somente para uso profissional. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/roupa de proteção/proteção ocular/proteção facial. Siga as boas práticas microbiológicas de laboratório ao manusear amostras clínicas e cultura. As precauções padrão, de acordo com as diretrizes estabelecidas, devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser consultadas nas fichas de dados de segurança individuais. Limitações 1. Embora o meio seja recomendado para o isolamento seletivo, outros testes bioquímicos e sorológicos devem ser realizados para confirmação adicional. 2. A superfície do meio deve estar seca quando inoculada. 3. Os organismos individuais diferem em suas necessidades de crescimento e podem apresentar padrões de crescimento variáveis no meio. 4. Cada lote do meio foi testado para os organismos especificados no COA. Recomenda-se aos usuários que validem o meio. Recomenda-se que os usuários validem o meio para qualquer microrganismo específico que não seja mencionado no COA com base nos requisitos exclusivos do usuário. Desempenho e avaliação: O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções do rótulo, dentro do período de validade, quando armazenado na temperatura recomendada. Controle de qualidade Aparência: Pó homogêneo de fluxo livre, amarelo claro a rosa Gelificação: Firme, comparável ao gel de ágar 1,5%. Cor e clareza do meio preparado: Vermelho com coloração arroxeada, transparente a ligeiramente opalescente, formando um gel em placas de Petri. Reação: Reação de solução aquosa de 5,15% p/v a 25°C. pH: 7,1±0,2 pH 6.90-7.30 Resposta cultural: A resposta cultural foi observada após uma incubação a 30-35°C por 18-72 horas. A taxa de recuperação é considerada como 100% para crescimento bacteriano no ágar Soybean Casein Digest. 1. Propriedades promotoras de crescimento O crescimento de microrganismos comparável ao obtido anteriormente com lote de meio previamente testado e aprovado ocorre na temperatura especificada por um período não superior ao menor período de tempo especificado, inoculando 100 ufc (a 30-35°C por <= 18 horas). 2. Propriedades indicativas As colônias são comparáveis em aparência e a reação de indicação àquelas obtidas anteriormente com lotes de meio previamente testados e aprovados ocorre para a temperatura especificada por um período dentro da faixa especificada de inoculação <= 100 ufc (a 30-35°C por 18-72 horas). Armazenamento e prazo de validade: Armazene entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 20-30°C. Use antes da data de validade indicada no rótulo. Após a abertura, o produto deve ser armazenado adequadamente e seco, depois de tampar bem o frasco, para evitar a formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de grumos. Armazene em local seco e ventilado, protegido de temperaturas extremas e fontes de ignição. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do período de validade declarado. Descarte: O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclavagem e/ou incineração das preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Siga os procedimentos laboratoriais estabelecidos para o descarte de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com amostras clínicas. O usuário deve garantir o descarte seguro por meio de autoclavagem e/ou incineração das preparações usadas e inutilizadas desse produto. Referências 1. Murray P. R, Baron E, J., Jorgensen J. H., Pfaller M. A., Yolken R. H., (Eds.), 8th Ed., 2003, Manual of Clinical Microbiology, ASM, Washington, D.C. 2. Wehr H. M. and Frank J. H., 2004, Standard Methods for the Microbiological Examination of Dairy Products, 17th Ed., APHA Inc., Washington, D.C. 3. FDA Bacteriological Analytical Manual, 2005, 18th Ed., AOAC, Washington, D.C. 4. Salfinger Y., and Tortorello M.L. Fifth (Ed.), 2015, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, 5th Ed., American Public Health Association, Washington, D.C. 5. Lipps WC, Braun-Howland EB, Baxter TE,eds. Standard methods for the Examination of Water and Wastewater, 24th ed. Washington DC:APHA Press; 2023. 6. British Pharmacopoeia, 2019, The Stationery office British Pharmacopoeia. 7. The United States Pharmacopoeia, 2018, The United States Pharmacopeial Convention, Rockville, M.D. 8. Williams, (Ed.), 2005, Official Methods of Analysis of the Association of Official Analytical Chemists, 19th Ed., AOAC, Washington, D.C 9. Medrek T. F and Barnes Ella M., 1962, J. Appl. Bacteriol., 25(2),159-168. 10.Thornley Margaret J., 1957, J. Appl. Bacteriol., 20(2), 273-285. 11.Barnes Ella M. and Shrimpton D. H., 1957, J. Appl. Bacteriol., 20(2),273-285. 12.Eddy B. P., 1960, J. Appl. Bacteriol., 23(2).216-249. 13.MacConkey A., 1905, J. Hyg., 5:333. 14.MacConkey A., 1900, The Lancet, ii:20. 15.Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook 2nd Edition.