Agar listeria palcam base frasco 500g

ÁGAR BASE IDENTIFICAÇÃO DE LISTERIA (PALCAM) (M1064I) USO PRETENDIDO Ágar Base Identificação de Listeria (PALCAM) com suplemento adicionado é recomendado para a detecção e contagem de Listeria monocytogenes de alimentos e ração animal. A composição e o desempenho deste meio estão de acordo com a especificação estabelecida na ISO 11290-2. COMPOSIÇÃO** Ingredientes (g/L) Peptona especial: 23,000 Amido de milho: 1,000 Cloreto de sódio: 5,000 Extrato de Levedura: 3,000 D-Manitol: 10,000 Dextrose anidro: 0,500 Esculina: 0,800 Citrato de amônio férrico: 0,500 Cloreto de Lítio: 15,000 Vermelho de fenol: 0,080 Ágar: 10,000 pH final (a 25°C): 7,2 ±0,2 **Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho INSTRUÇÕES Suspender 34,44g em 500mL de água purificada/destilada. Aqueça até a ebulição para dissolver o meio completamente. Esterilize em autoclave a 15 lbs de pressão (121°C) por 15 minutos. Resfrie a 45°C - 50°C e adicione assepticamente o conteúdo reidratado de 1 frasco de Suplemento Seletivo Listeria (FD061). Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis. PRINCÍPIO E INTERPRETAÇÃO Ágar Base Identificação de Listeria também conhecido como Ágar Polimixina, Acriflavina, Cloreto de Lítio, Ceftazidima, Esculina e Manitol (PALCAM) foi originalmente formulado por Van Netten et. al(5). O Comitê ISO recomendou este meio com uma ligeira modificação para a detecção e contagem de Listeria monocytogenes de alimentos e ração animal (1). Peptona especial e extrato de levedura fornecem compostos nitrogenados e carbonáceos, aminoácidos de cadeia longa, vitaminas do complexo B e outros nutrientes essenciais para o crescimento. Este meio emprega dois sistemas indicadores, esculina-citrato de amônio férrico e manitol-vermelho de fenol . Listeria monocytogenes hidrolisa a esculina em esculetina e dextrose. A esculetina reage com citrato de amônio férrico para formar um complexo marrom-escuro visto como um halo preto ao redor das colônias. Dextrose e o amido serve como fonte de energia. Contaminantes como estafilococos fermentam manitol e são indicados pela mudança de cor de vermelho para amarelo, facilitando a diferenciação. A incubação em condição microaerófila inibe aeróbios estritos, como Bacillus e espécies de Pseudomonas. Dependendo do tipo de amostra, o enriquecimento seletivo é feito antes da inoculação no Ágar PALCAM. Geralmente, o Meio de Enriquecimento Seletivo Listeria é usado para produtos lácteos, enquanto o Meio de Enriquecimento Seletivo Listeria UVM (M890), o Caldo de Enriquecimento Secundário Fraser (M1083) são usados para produtos de carne e aves. Após 24 horas de incubação espécies de Listeria mostram colônias cinza-esverdeadas ou verde-oliva, de 1,5mm - 2mm de diâmetro com halo preto, geralmente com centro preto. Após 48 horas, são observadas colônias de cor cinza-esverdeado, com cerca de 2mm de diâmetro, com halo preto e centro afundado preto. TIPO DE AMOSTRAS Amostras de alimentos e laticínios. COLETA E MANUSEIO DE AMOSTRAS Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras de acordo com as diretrizes (1,4). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. AVISO E PRECAUÇÕES Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/ vestuário de proteção/ proteção ocular/ proteção facial. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio das amostras. As orientações de segurança podem ser referidas em fichas de dados de segurança individuais. LIMITAÇÕES 1. É necessária uma identificação bioquímica adicional dos organismos para confirmação. DESEMPENHO E AVALIAÇÃO O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções no rótulo dentro do período de validade quando armazenado na temperatura recomendada. CONTROLE DE QUALIDADE Apariência: Pó homogêneo de fluxo livre de amarelo claro a rosa Gelificação: Firme, comparável com o gel de ágar a 1,0% Cor e clareza do meio preparado: Forma de gel na cor vermelha transparente a ligeiramente opalescente em placas de Petri. Reação: Reação de 6,9% p/v em solução aquosa a 25°C. pH: 7,2 ±0,2 pH: 7:00-7:40 Resposta cultural: Características culturais observadas sob condição microaerófila, com adição de Suplemento Seletivo Listeria(FD061), após uma incubação a 35-37°C durante 48 horas ORGANISMO: Enterococcus faecalis ATCC 29212 (00087)* INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Nada pobre RECUPERAÇÃO: <=10% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Colônias cinzas com um halo marrom esverdeado ORGANISMO: Enterococcus faecalis ATCC 19433 (00009)* INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Nada pobre RECUPERAÇÃO: <=10% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Colônias cinzas com um halo marrom esverdeado ORGANISMO: Listeria monocytogenes ATCC 19111 (00020)* INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Bem abundante RECUPERAÇÃO: >=50% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Verde acinzentado com centro preto e uma auréola preta ORGANISMO: Listeria monocytogenes ATCC 19117 INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Bem abundante RECUPERAÇÃO: >=50% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Verde acinzentado com centro preto e uma auréola preta ORGANISMO: Listeria monocytogenes ATCC 19118 INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Bem abundante RECUPERAÇÃO: >=50% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Verde acinzentado com centro preto e uma auréola preta ORGANISMO: Staphylococcus aureus subsp. aureus ATCC 25923(00034)* INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Nada pobre RECUPERAÇÃO: <=10% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Colônias amarelas com halo amarelo ORGANISMO: Listeria monocytogenes ATCC 19112 INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Bem abundante RECUPERAÇÃO: >=50% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Verde acinzentado com centro preto e uma auréola preta ORGANISMO: Listeria monocytogenes ATCC 13932 (00021)* INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Bem abundante RECUPERAÇÃO: >=50% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Verde acinzentado com centro preto e uma auréola preta ORGANISMO: Listeria monocytogenes ATCC 35152 (00109)* INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Bem abundante RECUPERAÇÃO: >=50% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Verde acinzentado com centro preto e uma auréola preta ORGANISMO: Listeria innocua ATCC 33090 (00017)* INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Bem abundante RECUPERAÇÃO: >=50% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: Verde acinzentado com centro preto e uma auréola preta ORGANISMO: Eschrichia coli ATCC 25922 (00013)* INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Nada pobre RECUPERAÇÃO: <=10% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: - ORGANISMO: Escherichia coli ATCC 8739 (00012)* INÓCULO (UFC): 50-100 CRESCIMENTO: Nada pobre RECUPERAÇÃO: <=10% CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA: - Chave: * Números WDCM correspondentes ARMAZENAMENTO E PRAZO DE VALIDADE Armazene entre 10°C - 30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado entre 2°C - 8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Ao abrir, o produto deve ser armazenado adequadamente seco, após tampar bem o frasco para evitar a formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de grumos. Armazene em área seca e ventilada, protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche bem o recipiente após o uso. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade. DESCARTE O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Siga os procedimentos laboratoriais estabelecidos no descarte de materiais infecciosos e o material que entrar em contato com a amostra deve ser descontaminado e descartado de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (2,3). REFERÊNCIAS 1. International Organisation for Standardization (ISO), ISO/DIS11290-2 : 2017. Microbiology of food and other animal feeding stuffs- Horizontal method for the detection and enumeration of L. monocytogenes and other Listeria species. 2. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook 2nd Edition. 3. Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1. 4. Salfinger Y., and Tortorello M.L. Fifth (Ed.), 2015, Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods, American Public Health Association, Washington, D.C. 5. Van Netten P. et al, 1989, Int. J. Food Microbiol., 8(4):299.