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Agar fenilalanina frasco 500g
Código: AG-5024
Marca: HIMEDIA
Apresentação: 1 unidade
Meio de cultura liofilizado. Utilizado para detecção da atividade da desaminase da fenilalanina, principalmente em Proteus, Providencia e Morganella. Importante em identificação bioquímica de enterobactérias.
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Informações técnicas do produto
Agar fenilalanina frasco 500g
Recomendado para diferenciação dos gêneros Proteus e Providencia e de outros membros da família Enterobacteriaceae com base na sua capacidade de formar ácido fenil pirúvico a partir da fenilalanina. Composição** Ingredientes Gms / Litro Extrato de levedura 3.000 Cloreto de sódio 5.000 DL-fenilalanina 2.000 Fosfato dissódico 1.000 Ágar 15.000 PH final (a 25°C) 7,3 ± 0,2 ** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho Instruções Suspenda 26 gramas em 1000 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Dispensar em tubos e esterilizar autoclavando a 15 libras de pressão (121°C) por 15 minutos. Deixe o meio tubular esfriar em uma posição inclinada. Princípio e Interpretação A capacidade das espécies de Proteus de converter fenilalanina em ácido fenilpirúvico é uma reação importante na diferenciação de Enterobacteriaceae (1, 2). Com base nesse critério, a Buttiaux desenvolveu o Agar Fenilalanina para diferenciação de Proteus e grupo Providencia de outros membros de Enterobacteriaceae (3, 4) pela capacidade do organismo nos gêneros Proteus para desaminar a fenilalanina. O ágar fenilalanina é a modificação do meio originalmente desenvolvido por Ewing et al (5). O extrato de levedura no meio suporta o crescimento dos organismos. O cloreto de sódio mantém o equilíbrio osmótico. A fenilalanina serve como substrato das enzimas, capazes de desaminá-la para formar o ácido fenilpirúvico. A técnica consiste em inocular a superfície inclinada com bastante inóculo e incubá-la por 12 a 16 horas. Após a incubação, adicione 0,2 ml de solução de cloreto férrico a 10%, de modo que a solução inunda todo o crescimento. A adição de (0,2 ml 3-5 gotas) de 10% de solução aquosa de cloreto férrico (ou uma solução aquosa a 12% de cloreto férrico acidificada com 2,5 ml de HCl concentrado por 100 ml de reagente) às culturas após a incubação resulta no aparecimento de uma cor verde clara a profunda (reação positiva) ou nenhuma mudança de cor (reação negativa). Numa reação positiva, qualquer ácido fenilpirúvico presente reagirá com o sal férrico no reagente para dar uma cor verde. Interprete os resultados dentro de 5 minutos após a adição do reagente à medida que a cor verde desbota rapidamente (1, 4). Controle de qualidade Aparência: Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5% Cor e clareza do meio preparado: Gel âmbar claro, levemente opalescente, forma-se em tubos como inclinações Reação: Reação de solução aquosa a 2,6% p/v a 25°C. pH: 7,3 ± 0,2 pH: 7,10-7,50 Resposta cultural M281: Características culturais observadas após uma incubação a 35-37°C por 12-16 horas. Resposta cultural Organismo: Enterobacter aerogenes ATCC 13048 Inoculação:50-100 Crescimento:Exuberante Recuperação: >=70% Fenilalanina desaminase: Reação Negativa Organismo: Eschirichia coli ATCC 25922 Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=70% Fenilalanina desaminase: Reação Negativa Organismo: Proteus mirabilis ATCC 25933 Inoculação: 50-100 Crescimento: Exuberante Recuperação: >=70% Fenilalanina desaminase: Reação Positiva. Coloração verde após adição de 10% de cloreto férrico Organismo: Proteus vulgaris ATCC 13315 Inoculação:50-100 Crescimento:Exuberante Recuperação: >=70% Fenilalanina desaminase:Reação Positiva. Coloração verde após adição de 10% de cloreto férrico Organismo: Providencia alcalifaciens ATCC 9886 Inoculação:50-100 Crescimento:Exuberante Recuperação: >=70% Fenilalanina desaminase:Reação Positiva. Coloração verde após adição de 10% de cloreto férrico Armazenamento e prazo de validade Armazenar abaixo de 30°C em recipiente bem fechado e o meio preparado a 2-8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Referências: 1. Singer J. e Volcani B. E., 1955, J. Bacteriol., 69: 303. 2. Henrikson S. D., 1950, J. Bacteriol., 60: 225. 3. Buttiaux R., Osteux R., Fresnoy R. e Moriamez J., 1954, Ann. Inst. Pasteur Lille. 87: 375. 4. MacFaddin J. F., 1985, Media para Isolamento-Cultivo-Identificação-Manutenção de Bactérias Médicas, vol. 1, Williams Wilkins, Baltimore, Maryland. 5. Ewing W. H., Davis B. R. e Reavis R. W., 1957, Public Health Lab., 15: 153.
