Agar cleid com indicador de Andrade frasco 500g

MEIO C.L.E.D COM INDICADOR ANDRADE - M352 Uso pretendido: Recomendado para isolamento, enumeração e diferenciação de patógenos urinários com base na fermentação da lactose. Composição** Ingredientes Gms / Litro Peptona 4.000 HM peptona B # 3.000 Triptona 4.000 Lactose 10.000 L-cistina 0,128 Azul de bromotimol 0,020 Indicador Andrade 0,100 Ágar 15.000 pH final (a 25°C) 7,5±0,2 **Fórmula ajustada, padronizada para se adequar aos parâmetros de desempenho # - Equivalente ao extrato de carne bovina Instruções Suspenda 36,25 gramas em 1000 ml de água purificada/destilada. Aqueça até a ebulição para dissolver o meio completamente. Esterilize em autoclave a 15 libras de pressão (121°C) por 15 minutos. Arrefecer a 45-50°C. Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis. Princípio e Interpretação Sandys relatou uma nova técnica onde a enxameação de Proteus em um meio de ágar poderia ser evitada restringindo o conteúdo de eletrólitos no meio de cultura (1). O Sandys Medium foi modificado por Mackey e Sandys (2), substituindo o manitol por lactose e sacarose e elevando a concentração de ágar e azul de bromotimol. Os mesmos autores modificaram ainda mais este meio retendo a lactose (eliminando a sacarose) e incluindo L-cistina para promover o crescimento de colônias de coliformes anões dependentes de cistina (3). Este meio modificado posteriormente foi designado como C.L.E.D. (Cistina-Lactose-Deficiente em Eletrólitos) Meio. Este meio é recomendado para uso em bacteriologia urinária, promovendo o crescimento de todos os patógenos urinários. C.L.E.D. O meio também é recomendado para procedimentos com varetas de imersão e como meio de transporte de inóculo de imersão para amostras de urina (2,3,4). C.L.E.D. O meio foi modificado por Bevis (5) pela incorporação do indicador Andrades. Este meio fornece uma diferenciação mais nítida entre fermentadores de lactose (LF) e não fermentadores de lactose (NLF) (5). Adição do indicador Andrades melhora a aparência da colônia e auxilia na identificação de microrganismos. Em diferentes valores de pH, a cor do meio varia do meio padrão, o que é bem documentado por Bevis (5). pH Cor de C.L.E.D. médio 7.4 azul profundo 7,0 cinza azulado 6,8 cinza pálido 6.6 cinza rosado 6.4 vermelho brilhante com tonalidade esbranquiçada 6,0 vermelho brilhante Para melhores resultados, o meio não deve ser incubado por mais de 24 horas, pois se predominarem fermentadores de lactose, o todo o meio pode ficar rosa, mascarando a presença de fermentadores não-lactose. Inocule o meio imediatamente após a coleta de urina. As espécies de Shigella podem não crescer neste meio. O início prévio da terapia antibiótica, pH urinário baixo (inferior a 5), etc., podem resultar em baixa contagem de urina de pacientes infectados. Tipo de amostra Clínico: Amostra de urina Coleta e Manuseio de Amostras Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para manusear as amostras de acordo com as diretrizes estabelecidas (6,7). Aviso e precauções Apenas para diagnóstico in vitro. Apenas para uso profissional. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção/roupa de proteção/proteção para os olhos/proteção para o rosto. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e culturas. As precauções padrão de acordo com as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas ao manusear amostras clínicas. As orientações de segurança podem ser consultadas em fichas de dados de segurança individuais. Limitações 1. Este meio é recomendado para infecção urinária. Baixa contagem de urina pode ser resultado de antibioticoterapia, baixo pH da urina. 2. A recuperação depende da contagem de urina. 3. Inocule o meio imediatamente após a coleta de urina. 4. As espécies de Shigella não podem crescer neste meio. 5. Para melhores resultados, o meio não deve ser incubado por mais de 24 horas porque se predominarem fermentadores de lactose, todo o meio pode ficar rosado, mascarando a presença de não fermentadores de lactose. Desempenho e Avaliação O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com as instruções do rótulo dentro do período de validade quando armazenado na temperatura recomendada. Controle de qualidade Aparência Pó de fluxo livre homogêneo amarelo claro a amarelo acinzentado Gelificação Firme, comparável com gel de ágar 1,5% Cor e clareza do meio preparado Formas de gel azul esverdeado claro a levemente opalescente em placas de Petri Reação Reação de solução aquosa a 3,62% p/v a 25°C. pH: 7,5±0,2 pH 7,30-7,70 Resposta cultural Características culturais observadas após uma incubação a 35-37°C por 18-24 horas Organismo Inóculo (UFC) Crescimento Recuperação Cor da colônia # Klebsiella aerogenes 50-100 good-luxuriant >=70% verde acinzentado, ATCC 13048 (00175*) mucoide Escherichia coli 50-100 good-luxuriant >=70% rosa brilhante ATCC 25922 (00013*) com auréola rosa Enterococcus faecalis 50-100 good-luxuriant >=70% amarelo-alaranjado ATCC 29212 (00087*) ou esverdeado Proteus mirabilis 50-100 good-luxuriant >=70% azul-verde ATCC 25933 Staphylococcus aureus 50-100 good-luxuriant >=70% amarelo dourado subsp. aureus ATCC 25923 (00034*) Streptococcus pyogenes 50-100 good-luxuriant >=70% verde acinzentado ATCC 19615 Chave : *Números WDCM correspondentes. #- Anteriormente conhecido como Enterobacter aerogenes Armazenamento e vida útil Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 20-30°C. Use antes da data de validade no rótulo. Ao abrir, o produto deve ser armazenado adequadamente seco, após tampar bem o frasco para evitar a formação de grumos devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de grumos. Armazenar em área seca e ventilada protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição, feche bem o recipiente após o uso. Use antes da data de validade no rótulo. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do período de validade indicado. Disposição O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclavagem e/ou incineração de preparações usadas ou inutilizáveis deste produto. Siga os procedimentos laboratoriais estabelecidos no descarte de materiais infecciosos e o material que entrar em contato com a amostra clínica deve ser descontaminado e descartado de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (6,7). Referência 1. Sandys, 1960, J. Med. Lab. Technol., 17:224. 2. Mackey and Sandys, 1965, Br. Med. J., 2:1286. 3. Mackey and Sandys, 1966, Br. Med. J., 1:1173. 4. Dixson J. M. S. and Clark M. A., 1968, Conc. Med. Assoc. J., 99 (15) 5. Bevis T. D., 1968, J. Med. Lab. Technol., 25:38. 6. Isenberg, H.D. Clinical Microbiology Procedures Handbook. 2nd Edition. 7.Jorgensen, J.H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M.L., Richter, S.S and Warnock., D.W. (2015) Manual of Clinical Microbiology, 11th Edition. Vol. 1.