Agar base GC frasco 500g

O Meio Ágar GC, com adição de sangue ou hemoglobina e outros suplementos para isolamento seletivo e cultivo de gonococos. Composição** Ingredientes Gms / Litro Peptona, especial 15.000 Amido de milho 1.000 Fosfato dipotássico 4.000 Fosfato monopotássico 1.000 Cloreto de sódio 5.000 Ágar 10.000 PH final (a 25 ° C) 7,2 ± 0,2 **Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho.** Instruções Suspenda 7,2 gramas em 100 ml de água destilada, para formar uma base de força dupla. Aqueça até ferver para dissolver o meio completamente. Esterilize em autoclave a uma pressão de 15 libras (121°C) por 15 minutos. Arrefecer até 45-50°C e adicionar assepticamente Hemoglobina (FD022) preparada separadamente (100 ml de solução estéril a 2%) e Suplemento de GC com antibióticos (FD021). Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis. Para aumentar a seletividade de suplementos antibióticos médios, como V.C.N. Suplemento (FD023), V.C.N.T. Suplemento (FD024), Suplemento Linco T (FD026) ou Suplemento Vanclo T (FD028) pode ser adicionado. Para melhorar as propriedades nutricionais do meio, Suplemento de Crescimento Vitamino (FD025) ou Autolisado de Levedura Suplemento (FD027) pode ser adicionado. Para o chocolate Blood Agar, prepare meio de força única usando 3,6 gramas em 100 ml de água destilada. Esterilize em autoclave a 121 lb de pressão (15 lb) por 15 minutos e adicione 5% v / v de sangue desfibrinado. Misture bem e aqueça a 80°C por 10 minutos. Princípio e Interpretação A maioria das infecções gonocócicas são infecções do trato genital inferior, sem complicações, causadas por infecção direta do colunar epitélio das membranas mucosas. Neisseria gonorrhoeae é o agente causador de infecções gonocócicas. A maioria das cepas de Neisseria possui requisitos de crescimento complexos; algumas cepas podem ser requintadamente sensíveis a ácidos graxos, necessitando da incorporação de amido solúvel no meio de crescimento (1). Johnston desenvolveu um meio que poderia obter o crescimento de Neisseria em 24 horas, em vez das 48 horas usuais (2). Este meio foi posteriormente modificado por Carpenter e Morton (3), pela adição de hemoglobina. Thayer e Martin melhoraram a seletividade do GC Medium pela incorporação dos antibióticos colistina, vancomicina e nistatina (V.C.N.) (FD023) (4, 5). Um antibiótico lactato trimetoprim adicional (7) foi posteriormente acoplado a V.C.N. aumentar ainda mais a seletividade do meio (FD024) (6). Para o cultivo de organismos exigentes, o meio deve ser suplementado com fatores de crescimento essenciais fornecidos predominantemente pelo extrato de levedura (FD027). Isso pode ser substituído por um suplemento quimicamente definido, contendo fatores de crescimento essenciais disponíveis a partir do extrato de levedura no Suplemento de Crescimento Vitamino (Twin Pack) (FD025). O fator X necessário para o crescimento de espécies exigentes de Haemophilus é fornecido pela hemoglobina (FD022). A GC Medium Base pode ser usada como base para a preparação do Thayer Martin Medium pela adição de FD027, que contém autolisado de levedura como fonte de fatores essenciais de crescimento e V.C.N.T. antibióticos como agentes seletivos (6, 7). Vancomicina (3 mg / lit) em V.C.N.T. O suplemento (FD024) foi substituído pela lincomicina, uma vez que o posterior foi menos inibidor dos gonococos (8, 9). Também a nistatina foi substituída pela anfotericina B (em FD024) para melhorar a seletividade dos contaminantes do meio a leveduras, encontrados regularmente em amostras vaginais (10). Este suplemento modificado é o Linco T Supplement (FD026). Determinadas cepas de gonococos foram consideradas sensíveis a 3 mg / lt de vancomicina usada regularmente (8). Portanto, a concentração de vancomicina foi reduzida para 2 mg / litro para obter o crescimento dessas cepas sensíveis (10). Este suplemento modificado com concentrações reduzidas de vancomicina e anfotericina B é o suplemento Vanclo T (FD028). Tipo de amostra Amostras clínicas: sangue, exsudatos respiratórios Coleta e manuseio de amostras Para amostras clínicas, siga as técnicas apropriadas para o manuseio das amostras, de acordo com as diretrizes estabelecidas (11,12). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. Aviso e precauções Apenas para diagnóstico in vitro. Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Use luvas de proteção / roupas de proteção / proteção para os olhos / proteção para o rosto. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. As precauções padrão, de acordo com as diretrizes estabelecidas, devem ser seguidas durante o manuseio de amostras clínicas. As diretrizes de segurança podem ser consultadas em folhas de dados de segurança individuais. Limitações 1. Suplementos de crescimento como hemoglobina e Vitamino devem ser adicionados ao crescimento de organismos exigentes como Haemophilus e Gonococci. 2. Realize testes confirmatórios de todas as colônias Desempenho e Avaliação A performance do meio é esperada quando usada de acordo com a direção na etiqueta dentro do prazo de validade, quando armazenada na temperatura recomendada. Controle de qualidade Aparência Creme para amarelar pó homogêneo de fluxo livre Gelificação Firme, comparável com gel de ágar a 1,0%. Cor e clareza do meio preparado Meio basal: Gel de cor amarelo claro claro a ligeiramente opalescente. Após adição de 2% de hemoglobina: marrom chocolate formas de gel opaco colorido em placas de Petri. Reação Reação de solução aquosa a 3,6% p / v a 25 ° C. pH: 7,2 ± 0,2 pH: 7.00-7.40 Resposta cultural M434: Características culturais observadas na presença de 5-10% de dióxido de carbono (CO2) e 70% de umidade com adição de estéril Hemoglobina a 2% (FD022) e suplemento de GC com antibióticos (FD021), após uma incubação a 35-37 ° C por 40-48 horas. Organismo: Haemophilus influenzae ATCC 19418 Inoculação: 50-100 Crescimento: Bom- Exuberante Recuperação: >=50% Organismo: Neisseria gonorrhoeae ATCC 19424 Inoculação: 50-100 Crescimento: Bom- Exuberante (com adição de suplementos antibióticos) Recuperação: >=50% Organismo: Neisseria meningitidis ATCC 13090 Inoculação: 50-100 Crescimento: Bom- Exuberante (com adição de suplementos antibióticos) Recuperação: >=50% Organismo: Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Inoculação: 50-100 Crescimento: Bom-Exuberante Recuperação: >=50% Organismo: Streptococcus pyogenes ATCC 6303 Inoculação: 50-100. Crescimento: Bom-Exuberante Recuperação: >=50% Referências: 1. Murray P. R., Baron E. J., Pfaller M. A., Jorgensen J. H. and Yolken R. H., (Eds.), 2003, Manual of Clinical Microbiology , 8th Ed., American Society for Microbiology, Washington, D.C 2.Johnston J., 1945, J. Vener. Dis. Inform., 26:239. 3.Carpenter C. M. and Morton H. E., 1947, Proc. N.Y. State Assoc. Public Hlth. Lab., 27:58. 4.Thayer J. D. and Martin J. E., 1964, Public Health Rep., 79:49 5.Thayer J. D. and Martin J. E., 1966, Public Health Rep., 81:559 6. Martin J. E. and Lester A., 1971, HSMHA Health Rep., 86:30 7.Seth A., 1970, Brit. J. Vener. Dis., 46, 201-202 8.Reyn A. and Bentzon M. W., 1972, Brit. J. Vener. Dis., 48, 363-368 9.Mirrett S., Reller L. B. and Knapp J. S., 1981, J. Clin. Microbiol., 14. 94-99