Agar base Bacillus cereus frasco 500g

O Ágar Base Bacillus Cereus com suplementos adicionados é utilizado como meio seletivo para o isolamento e enumeração de Bacillus cereus a partir de amostras de alimentos. Composição** Ingredientes Gms / Litro Peptona 1.000 Mannitol 10.000 Cloreto de sódio 2.000 Sulfato de magnésio 0,100 Fosfato dissódico 2.500 Fosfato monopotássico 0,250 Piruvato de sódio 10.000 Azul de bromo-timol 0,120 Ágar 15.000 PH final (a 25 ° C) 7,2 ± 0,2 ** Fórmula ajustada, padronizada para atender aos parâmetros de desempenho Instruções Suspenda 20,5 gramas em 475 ml de água destilada. Aqueça até ferver para dissolver completamente o meio. Esterilize em autoclave a 15 lbs de pressão (121°C) por 15 minutos. Arrefecer a 45-50°C e adicionar assepticamente o conteúdo reidratado de 1 frasco para injetáveis de Polimixina B Suplemento seletivo (FD003) e 25 ml de emulsão estéril de gema de ovo (FD045). Misture bem e despeje em placas de Petri estéreis. Princípio e Interpretação Bacillus cereus causa intoxicação alimentar devido ao consumo de arroz contaminado (4,6), infecções oculares (5) e uma ampla variedade de outras condições clínicas como formação de abscesso, meningite, septicemia e infecção de feridas. Bacillus cereus é um conhecido causa de mastite por doença, principalmente em ovelhas e novilhas entre os veterinários (7). Holbrook e Anderson (1) desenvolveram Ágar Bacillus Cereus, que é um meio altamente específico e seletivo para o isolamento e enumeração de Bacillus Cereus de alimentos. Suporta o crescimento de até um pequeno número de células e esporos de Bacillus cereus na presença de grande número de outros contaminantes alimentares. As colônias típicas de Bacillus cereus são crenadas, com cerca de 5 mm de diâmetro e têm uma cor turquesa distinta a azul pavão cercada por um bom precipitado de gema de ovo da mesma cor. As bactérias fazem não fermenta manitol e, portanto, não há alteração na cor do corante indicador ao redor das colônias. A adição de sulfato de polimixina-B (2,3) a uma concentração final de 100 unidades por ml de meio é suficiente para produzir meio seletivo para o isolamento de Bacillus cereus. Ele suprime o crescimento da flora bacteriana associada. Se os moldes forem suspeita no inóculo, 40 mcg por ml de cicloheximida esterilizada por filtro podem ser incorporados para suprimir o molde contaminação. Algumas cepas de Bacillus cereus apresentam reação muito fraca na gema de ovo. Além disso, neste meio Bacillus cereus é indistinguível de Bacillus thuringiensis. A peptona fornece e o piruvato de sódio melhora a precipitação da gema de ovo e aumenta a esporulação. O azul de bromotimol atua como Indicador de pH para detectar a fermentação do manitol. Para o isolamento e enumeração de Bacillus cereus nos géneros alimentícios, é recomendado o seguinte método. Distribua 0,1 ml da amostra homogeneizada diluída em água de peptona (M028) no superfície do meio. Incubar a 37 ° C em condições aeróbicas por 24-48 horas. O possível crescimento de contaminantes é bastante reduzido por incubação por 24 horas. Relate os resultados como o número de colônias de Bacillus cereus por grama de peso da amostra de alimentos. Testes confirmatórios devem ser realizados antes da interpretação. Tipo de amostra Amostras de alimentos e laticínios. Coleta e manuseio de amostras: Para amostras de alimentos e laticínios, siga as técnicas apropriadas para coleta e processamento de amostras, de acordo com as diretrizes (7,8,12). Após o uso, os materiais contaminados devem ser esterilizados em autoclave antes de serem descartados. Aviso e precauções: Leia o rótulo antes de abrir o recipiente. Usar luvas de proteção/vestuário de proteção/proteção ocular/facial proteção. Siga as boas práticas de laboratório microbiológico ao manusear amostras e cultura. Precauções padrão conforme as diretrizes estabelecidas devem ser seguidas durante o manuseio das amostras. As diretrizes de segurança podem ser consultadas em fichas de dados de segurança individuais. Limitações: Bacillus cereus e Bacillus thuringiensis apresentam características idênticas e, portanto, difíceis de identificar. A identificação de Bacillus cereus é feita por características e reação das colônias, no entanto bioquímicas adicionais características devem ser realizadas para confirmação. Algumas cepas de Bacillus cereus podem apresentar crescimento deficiente devido a variações nutricionais. Desempenho e Avaliação O desempenho do meio é esperado quando usado de acordo com a direção na etiqueta dentro do prazo de validade quando armazenado em temperatura recomendada. Controle de qualidade Aparência: Pó de fluxo livre homogêneo creme a amarelo esverdeado Gelificação: Firme, comparável com gel de ágar a 1,5% Cor e clareza do meio preparado: Meio basal: Gel de cor verde clara a levemente opalescente. Após adição de emulsão de gema de ovo: Verde amarelado formas de gel opaco colorido em placas de Petri Reação: Reação de solução aquosa a 4,1% p / v (meio basal) a 25 ° C. pH: 7,2 ± 0,2 pH: 7.00-7.40 Resposta cultural Características culturais observadas com o suplemento seletivo de polimixina B (FD003) e emulsão de gema de ovo (FD045) após uma incubação a 35-37°C por 24-48 horas. Resposta cultural Organismo: Bacillus cereus ATCC 10876 Inoculação: 50-100 Crescimento: Bom-Exuberante Recuperação: >=50% Cor da Colônia: Azul Reação Ovo Yolk: Precipitado Azul Organismo: Escherichia coli ATCC 25922 (00013*) Inoculação: >=10³ Crescimento: Inibido Recuperação:0% Cor da Colônia: - Reação Ovo Yolk: - Organismo: Proteus vulgaris ATCC 13315 Inoculação: 50-100 Crescimento: Bom-Exuberante Recuperação: >=50% Cor da Colônia: Verde Reação Ovo Yolk: Negativo Organismo: Serratia marcescens ATCC 8100 Inoculação: 50-100 Crescimento: Bom-Exuberante Recuperação: >=50% Cor da Colônia: rosa amarelo claro(a produção de pigmentos é aprimorada por incubação a 25-30°C) Reação Ovo Yolk: Negativo Organismo: Staphylococcus aureus ATCC 25923 (00034*) Inoculação:50-100 Crescimento: Bom-Exuberante Recuperação:>=50% Cor da Colônia: Amarelo Reação Ovo Yolk: Positivo, claro. Armazenamento e prazo de validade: Armazenar entre 10-30°C em um recipiente bem fechado e o meio preparado a 2-8°C. Use antes da data de validade no rótulo. Na abertura, o produto deve ser adequadamente armazenado seco, depois de fechar bem o frasco para evitar formação de caroços devido à natureza higroscópica do produto. O armazenamento inadequado do produto pode levar à formação de caroços. Armazenar em local seco área ventilada protegida de temperaturas extremas e fontes de ignição. Feche o recipiente firmemente após o uso. Usar antes do prazo de validade no rótulo. O desempenho do produto é melhor se usado dentro do prazo de validade indicado. Descarte: O usuário deve garantir o descarte seguro por autoclave e/ou incineração de preparações usadas ou não utilizáveis deste produto. Segue procedimentos laboratoriais estabelecidos na eliminação de materiais infecciosos e materiais que entram em contato com a amostra deve ser descontaminada e descartada de acordo com as técnicas laboratoriais atuais (10,11). Referências: 1. Holbrook R. e Anderson J., 1980, Can. J. Microbiol. 26 (7): 753-759 2. Donovan K.O., 1958, J. Appl. Bacteriol, 21 (1): 100. 3. Mossel D. A., Koopman J. e Jongerius E., 1967, J. Appl. Microbiol. 15 (3): 650-653. 4. Mortimer P.R. e McCann G., 1974, Lancet, 1043-1045. 5. Bouza E., Grant S., Jordan C. et ai., 1979, Arch. Oftalmol. 97: 498 6. Wohlgemuth K., Kirkbride, CA, Bicknell, E.J. e Ellis, R.P., 1972, J. Am. Veterinario. Med. Bunda. 161: 1691-1695. 7. Kirnbull P.C., J. Clin. Pathol. 32: 289 8. American Public Health Association, Métodos Padrão para o Exame de Produtos Lácteos, 1978, 14ª Ed., Washington DC. 9. Salfinger Y. e Tortorello M.L. Quinta (Ed.), 2015, Compêndio de Métodos para o Exame Microbiológico de Alimentos, 5ª Ed., American Public Health Association, Washington, D.C. 10.Isenberg, H.D. Procedimentos Clínicos de Microbiologia. 2ª Edição. 11. Jorgensen, J. H., Pfaller, M.A., Carroll, K.C., Funke, G., Landry, M. L., Richter, S. S. e Warnock., D.W. (2015) Manual de Microbiologia Clínica, 11ª Edição. Vol. 1 12. Wehr H. M. e Frank J. H., 2004, Métodos Padrão para o Exame Microbiológico de Produtos Lácteos, 17ª Ed., APH Inc., Washington, D.C.